El Distrito Metropolitano de Quito está formado por 85 quebradas que bajan desde las laderas del volcán Pichincha a la ciudad. Estas zonas mantienen la estabilidad del suelo, sin embargo, asentamientos informales, altos índices de deforestación y tala ilegal han provocado procesos de erosión y riesgo de deslizamientos. Esto marca una nueva perspectiva que demuestra la vulnerabilidad física, social, económica y ambiental en que vive la población debido a la falta de programas de reforestación sustentable con especies forestales nativas. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar el protocolo de establecimiento y multiplicación in vitro de Quishuar para evaluar su viabilidad. Para el efecto, se realizaron cultivos in vitro de Quishuar partiendo de yemas axilares de plantas madre de vivero. Utilizando tres eta (desinfección, establecimiento y multiplicación) se evaluaron medios de cultivo y biorreguladores. Los resultados indican que los explantes sometidos a mayores concentraciones de cloro y tiempo (2,5% y 15 min) determinaron mayores porcentajes de supervivencia en MSVG (70%) y MSVG/2 (76,7%). En el caso de los explantes establecidos, aquellos sin concentraciones de BAP (0 mg/L) presentaron mayor crecimiento vegetativo y longitud de brotes (13.36 mm) y (13.15 mm) para MSVG/2 y MSVG. De acuerdo a los ensayos de multiplicación, bajas concentraciones de KIN (1,12 mg/L) y BRS (0,4 ppm) desarrollaron índices mayores de brotación (4,05% y 4,12%) respectivamente, en comparación con las dosis más altas de BAP (3,37 mg/L) cuyo valor es fue de 3,03%. Basados en los resultados obtenidos en la presente investigación, se puede sugerir que los medios de cultivo y biorreguladores evaluados son efectivos para la determinación de un protocolo de establecimiento y multiplicación in vitro de Quishuar.